Covalent immobilization of horseradish peroxidase on macroporous glycidyl methacrylate based copolymer

Abstract

U ovom radu peroksidaza iz rena (HRP) je kovalentno imobilizovana na kopolimeru glicidil metakrilata i etilenglikol dimetakrilata pomoću dve kovalentne metode. Ispitani su uticaji prečnika pora i površinskih karakteristika kopolimera na enzimsku aktivnost i stabilnost. Enzim imobilizovan perjodatnom metodom je pokazao veću aktivnost i stabilnost u poređenju sa glutaraldehidnom metodom. HRP imobilizovana na kopolimer SGE-20/12 sa prečnikom pora od 120 nm je pokazala najveću specifičnu aktivnost i dobru termostabilnost. Km vrednost imobilizata je bila 10,8 mM što je oko 5,6 puta više od rastvornog enzima. Obe forme enzima su pokazale optimum na pH 7, ali je imobilizovana HRP pokazala širi pH optimum u odnosu na rastvornu formu. Operaciona stabilnost je bila zadovoljavajuća i nakon pet uzastopnih upotreba zaostala aktivnost je bila 45%.